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PCR实验室建设的几个关键点:
(1)平面布局:不论是组合式还是分散式布置的PCR实验室,各功能房间均宜设置独立缓冲间
(2)区域空气流向:为避免互相污染,PCR实验室空气流向必须严格遵循单一方向进行,即只能从试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。
(3)通风空调:为避免交叉污染,各功能用房内空气不能掺混。混合式PCR实验室应采用新风直流空调系统,当采用新风系统有困难时,各区域的空气只能在自己的房间内循环。
(4)生物安全:按照实验室生物安全指南(第二版)的规定,2019-nCoV病原体暂按照第二类病原微生物进行管理,则样本植被区宜为负压或加强型P2实验室,核酸操作应在生物安全柜内进行。
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PCR实验室设计及建设要求:PCR实验指的是基因扩增实验,其特点是能将微量的DNA大幅增加,是分子生物学研究和实验的常规方法,PCR实验室广泛应用于生物学各个领域,例如:乙型,禽疫病、检测,癌基因的检测和诊断,个体识别,DNA指纹,及法医物证等等。
PCR实验室布局:PCR实验室原则上分为:①试剂准备区;②样品制备区;③扩增区;④扩增产物分析区,共四个单独的工作区域。并设有走廊,各工作区域应设缓冲间,工作区与缓冲间宜安装连锁装置。
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PCR 实验室基本要求:
1、 PCR 实验室依据所使用的方法可分为试剂准备、标本制备、扩增、产物分析等三或四个区域。只是使用实时荧光PCR仪、HIV病毒载量测定仪的PCR实验室,有上述前面三个区域即可。各区域应完全独立分隔,不应有任何的空气直通。
2、标准的PCR实验室产物分析区或三个区域的后一个区域(即扩增及产物分析区),空气流向应由室外向室内,可通过在室内设置通风橱、排风扇或其他排风系统达到空气流由室外向室内流动的要求。
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PCR实验室的设计规范
区域气压调节
试剂准备区和样品处理区宜呈微正压,以防外界含核酸气溶胶的空气进入,造成污染,可以通过控制进风风量大于排风风量达到正压效果;核酸扩增区和产物分析区应呈微负压,以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品,可以通过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。PCR实验室缓冲区内可设置正压,使得室内空气不流向室外,室外空气不流向室内。
各区域通过气压调节,使得在整个PCR实验过程中,试剂和样品免受气溶胶污染,并降低扩增产物对操作人员和环境的污染。另外各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、人员流动与气流,形成单向流程的保护屏障,避免实验之间的相互干扰,防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。
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