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外泌体粒径及浓度测试服务服务介绍「科锐诺」花果山云雾茶
2023-11-15 03:32  浏览:41
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7分钟前 外泌体粒径及浓度测试服务服务介绍「科锐诺」[科锐诺44070b2]内容:

外泌体分离提取方案。主要方案包括:

1、差速超1速离心法;

适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品;

2、基于PEG沉淀原理的试剂盒法;

适用于血1清、脑脊液等小体积的样品;

3、超滤提取法;

适用于细菌培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配超1速离心法,做进一步的提取。

外泌体是细胞外囊泡的一种,其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似,电镜下,显示出典型的茶托状超微结构。实际操作中,通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括:透射电镜(形态鉴定)、NTA检测(粒径及浓度鉴定)、WB(分子标志物)。NTA检测作为外泌体鉴定的经典方法之一,可同时反映出检测样品的浓度及粒径。质量较好,纯度较高的外泌体样品,粒径分布在30-150nm,原液浓度在10^9左右。为了保证检测质量,对每一个样品,都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日,可当天到样当天出结果。

外泌体是由细胞分泌的纳米级膜性小囊泡,直径约30~150nm。外泌体来源多样,广泛存在并分布于各种生物液体中,富含来源细胞的蛋白质、脂质和核酸,参与细胞间的信息交流。不同病理和生理条件下,外泌体的内容物不尽相同,因此外泌体可以很好地反映生物体的疾病与健康状态。此外,外泌体特殊的膜结构能够保护其内容物如RNA(microRNA、mRNA、lncRNA、circRNA)免受酶的降解,保证其能在各类体液中被稳定检测到,因此外泌体是研究各种疾病的良好生物学材料,可作为肿1瘤潜在的biomarker和治1疗靶点,亦可作为基因/药1物的递送载体,在疾病的诊断和治1疗方面具有广阔的应用前景。

外泌体与微泡:我们知道,细胞间相互作用可以通过释放蛋白质、核酸、脂质等分子到胞外与受体结合从而介导胞内细胞传导。

除此之外,细胞还可以释放膜囊泡,外泌体与微泡就是其中两种,二者相似但形成方式不同:外泌体是细胞内内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中的膜囊泡,而微泡则是细胞出芽与细胞膜融合后直接脱落形成的囊泡,且外泌体大小均一, 直径在40~100 nm,其大小取决于其起源部位以及细胞中的脂质双层结构;而微泡大小不一,直径在50 ~1000 nm之间。

外泌体富含原始修复力,应用比较广泛。目前,干1细胞外泌体在烧1伤烫1伤,难愈合性溃疡及术后创伤修复领域的潜在应用价值比较大。

外泌体与皮肤抗1衰老我们先从皮肤衰老说起,皮肤衰老是从表皮层到层的衰老,比如角质形成细胞增殖能力减退、成纤维细胞功能异常、乳1头层变平、细胞外基质成分及含量的变化等是内外源性皮肤老化共同的病理生理改变。

整个皮肤衰老的原因,通常归于基因变异,端粒异常,蛋白质和细胞损伤增加,炎1症,细胞衰老加内源性干1细胞耗尽等问题。

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